RT-PCR技术服务
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介绍
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产品
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RT-PCR金牌技术服务:北京爱迪博生物的专业技术人员为你排忧解难、为你节约宝贵的时间
RT-PCR( Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)是将RNA的逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增反应(PCR)相结合的技术。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛,可用于检测细 胞/组织中基因表达水平,细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。生物科研工作经常会遇到需要从特定的细胞或组织中克隆特定目的基因,该项工作包括RNA的抽取、定量、逆转录、PCR扩增、PCR产物纯化、克隆、测序等一系列复杂的过程。北京爱迪博生物凭借经验丰富的技术力量,可将您从这一系列繁琐的工作中解脱出来,大大节约你宝贵的时间。
技术特点:
1.应用范围广:作为模板的RNA可以是从细胞或组织中提取的总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。用于逆转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种。
2. 灵敏度高:RT-PCR使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量RNA样品分析成为可能。
3.操作简便:得到数据和样品较探测蛋白质表达数量要简单。
4.应用广泛:该技术主要用于分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。
服务队伍:
北京爱迪博生物的技术人员不仅受过严格的分子生物学正规科研训练,而且具有国家重点实验室实际工作经验,经过不断的优化和改进,积累了大量的经验,摸索出了一套快速优质的RT-PCR检测系统和分子克隆实验技术,实现了大规模生产要求的重复性和稳定性。北京奥运会之际北京爱迪博生物开始承接国际订单, 为国外的客户制作大量分子克隆和表达纯化具有生物活性的蛋白。
服务内容:
1。RT-PCR检测细胞/组织在转染特定shRNA后目的基因表达差异。2。RT-PCR检测检测细胞或组织中基因表达变化,如药物治疗前后相关基因表达水平的变化,RT-PCR方法是常用的手段之一。本实验方法可对目的基因的表 达进行定性检测,并以b-Actin或GAPDH等管家基因作为内参照,对目的基因的表达量进行半定量检测。
操作程序
1.由您提供待检测目的基因的有关材料,共同探讨服务的可能性和技术路线。
2.签订技术服务合同,商定服务收费、任务期限等。
3.由您提供实验所需要的足够量的样品(100mg组织块或107个细胞),本公司不接受您提供的RNA样品。除非您有足够的证据证明所提供的RNA没有 问题。
4。RT-PCR过程中的所需引物,您可以委托本公司设计合成,也可以由您提供。但是引物必须是PAGE纯化的高质量的干粉,一般我们不接受已溶解的引物。 我们进行RNA的抽提、RNA定量、反转录、PCR扩增、电泳、电泳结果的数码拍照及相关分析数据。
5.提供实验报告,包括实验方法、步骤、所用试剂、仪器、数码照片及相关分析数据等。
客户须知:
1.客户须在实验开始前确保其细胞或组织中有目的基因的表达,并提供目的基因的相关信息。
2.本公司也可以在实验定单前为客户检测其细胞或组织中是否有目的基因的表达,检测费用需另外收取。
3.本公司在收到客户提供的材料后会在第二个工作日起开始检测工作。
4. 检测工作完毕后,本公司会将检测结果和相关图片发给客户。
5.客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
服务承诺:
1.本公司会在最短的时间内快速将实验完成。
2.本公司保证检测结果准确、客观、可信,但不能确保一定要得到某特定结果。各个阶段过程收费标准如下:
RNA抽提(总RNA提取)
提供结果:
总RNA>50mg,电泳图
交货时间:
5天
交货形式:
总RNA的水溶液加入1/10体积3mol NaAc(pH=5.2),2.5倍体积无水乙醇(无水乙醇必须冷冻于-20℃冰箱)混匀于密封的(RNase-Free)Eppendorf管,-70℃保存;A4纸的实验报告。
样品要求:
根据实验目的提供相应量的组织和细胞。
样品包装要求:
动物组织离体后必须立即用生理盐水清洗,时间不超过10分钟,马上用一次性塑料手套或铝箔包好冻入液氮中,-70℃低温冰箱保存;植物组织必须保证新鲜,用液氮速冻后放入-70℃低温冰箱保存;细胞为培养瓶培养。
同时请避免样品储存时间过长,有融化或者溶解。费用标准:
20份以下每份样品80元,超过20份每份60元,最低收费1200元。
用途:
测序、质粒构建
提供结果:
经扩增得到的DNA片断,共20ml
交货时间:
2天
交货形式:
电泳图谱,Eppendorf管
样品要求:
mRNA--浓度≥50ng/ml,体积≥5ml;引物长度及G、C含量,引物若为干粉,请提供引物的准确量;若为稀释液,请提供引物的最终浓度(每个反应所需的引物满足以下要求:浓度≥10pm/ml,体积≥10ml)。
样品包装要求:
Eppendorf管
费用标准:
20份以下每份样品80元,超过20份每份60元,最低收费1200元。
用途:
测序、质粒构建
提供结果:
经扩增得到的DNA片断,浓度为50ng/ml,共20ml。
交货时间:
2天
交货包装:
电泳图谱,Eppendorf管
样品要求:
DNA模板--浓度≥50ng/ml,体积≥5ml;
引物--若为干粉,请提供引物的准确量;若为稀释液,请提供引物的最终浓度(每个反应所需的引物满足以下要求:浓度≥10pm/ml,体积≥10ml)。样品包装要求:
Eppendorf管
费用标准:
20份以下每份样品50元,超过20份每份35元,最低收费1000元。
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